1、為什么要進行STR鑒定????
STR(Short tandem repeats,短串聯重復序列)基因位點由長度為3~7個堿基對的短串聯重復序列組成,這些重復序列廣泛存在于基因組中,可作為高度多態(tài)性標記,被稱為細胞的DNA指紋,其可通過PCR(聚合酶鏈式反應)來檢測。
STR基因分型應用于細胞鑒定已被ATCC等機構強烈推薦。美國的ATCC細胞庫、德國的DSMZ細胞庫以及日本的JCRB細胞庫等為STR分型提供了各細胞株的數據供比對。越來越多的雜志在投稿時要求提供細胞STR分析數據,STR已被ATCC等機構作為細胞鑒定的金標準。
細胞作為重要的實驗模型,廣泛應用于各類實驗,幾乎所有科研實驗室都需要進行細胞培養(yǎng)。而我們也知道,細胞正確與否非常重要。如果細胞錯誤或者存在交叉污染情況,會導致實驗得出錯誤的結論,所有的實驗結果都會變得毫無意義。
據統(tǒng)計,目前有超過30%的細胞系被錯誤辨識或受到交叉污染。2010年《國際癌癥雜志》(IJC)統(tǒng)計出一列表,在346篇文章中,有103篇存在細胞被Hela細胞污染的情況。
最可怕的錯用是在瑞典某大學的一個研究組里,該研究組從1988年起就錯誤的使用了Hela,以為是lnt-407細胞系,并因此在從1988到2011年里發(fā)表了41篇論文,全部是錯的在高質量的雜志上。
近年來,大量研究表明 STR 基因分型方法是進行細胞交叉污染和性質鑒定的最有效和準確的方法之一。
2、什么情況下要細胞鑒定
1. 發(fā)表文章或申請課題經費前;
2. 使用細胞進行臨床治療(試驗)前;
3. 準備凍存保種或已凍存多年的細胞;
4. 一個涉及到細胞試驗項目開始/結束時;
5. 新得到的細胞或實驗室培養(yǎng)5代以上的;
6. 細胞系表現不穩(wěn)定或結果與預期差別較大;
7. 異體細胞移植后嵌合情況檢查。
非人源的細胞系,可以進行種屬鑒定,種屬鑒定結果判定一般包含兩項:是否為單一種屬來源細胞以及來源細胞種屬;
除了必要的種屬鑒定外,在使用細胞之前也可針對自身需求對細胞進行相關細胞特性的鑒定,如免疫熒光或流式檢測等。
用Axygen的基因組抽提試劑盒提取DNA,采用多重PCR體系,豬、牛、狗、兔、猴和貓熒光探針Qpcr擴增方案擴增,在ABI7500實時熒光定量檢測儀進行檢測。鑒定細胞樣品種屬及是否存6個種屬間的交叉污染現象。
3、高STR 匹配細胞
4、森貝伽細胞庫
生命科學,航無止境。南京生航生物技術有限公司坐落于南京江寧高新區(qū)智慧園,于2018年正式由南京森貝伽生物成立,集中研發(fā)生產胎牛血清,細胞培養(yǎng)等領域。為了給廣大生物醫(yī)藥企業(yè),醫(yī)院,高校等科研機構工作者提供更優(yōu)質的服務,于2023年4月正式上線細胞平臺。目前平臺擁有一支以趙教授為核心的經驗豐富、富有創(chuàng)新的技術團隊。平臺擁有整體萬級(C)局部百級(A)的GMP生產車間及完善的生物學實驗室,現建立一套嚴格的實驗技術操作規(guī)范和質量控制體系(已通過ISO9001認證)。引種自國內各大權威細胞庫,實行凍存及三級細胞庫管理模式。嚴格的代次管控,代次低,狀態(tài)好并有高匹配的STR鑒定。選擇生航細胞系享受國產價格,進口品質,并全程免費提供技術服務,客戶第一,服務至上。